在细胞培养过程中，细胞消化可是个关键步骤，选对了消化液，实验就能事半功倍！那么，面对市面上琳琅满目的细胞消化液，我们到底该如何根据自己的实验用途进行选择呢？今天小编就来给大家送上一份超实用的细胞消化液选择指南，帮你轻松搞定细胞消化！

市面上常见的细胞消化液通常分为以下几种：

一 胰蛋白酶消化液

胰蛋白酶，又称胰酶，是动物胰脏中所提取的一种丝氨酸蛋白水解酶，常用于解离组织和单层细胞。

普通胰蛋白酶消化液浓度多为0.25%，是实验室里的“老朋友”，适用于绝大多数贴壁细胞。另一种是添加了EDTA的胰蛋白酶-EDTA消化液，EDTA能够螯合金属离子，从而降低细胞之间的黏附能力，促进细胞的解离，但如果消化时间过长，可能会对细胞膜造成一些损伤，使用时要分外小心。

此外，如果要进行细胞凋亡检测，胰蛋白酶-EDTA消化液也不适用，Annexin V是一种钙离子依赖的磷脂结合蛋白，它通过与细胞膜外翻的磷脂酰丝氨酸（PS）结合来检测凋亡细胞，EDTA会螯合钙离子，从而影响Annexin V与PS的结合，进而干扰凋亡检测结果。

二 重组胰蛋白酶消化液

重组胰蛋白酶是一种使用基因工程技术生产的酶。

重组胰蛋白酶多用重组大肠杆菌或酵母系统重组表达并经过多步层析纯化获得，与天然提取的胰蛋白酶具有相同的特性，其氨基酸序列与动物源胰蛋白酶序列同源，能特异性切割多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基。因其无动物源污染性，在医药开发、生化研究领域中有着广泛的应用。

三 复合胰蛋白酶消化液

除了动物胰脏来源的胰酶外，目前有些功能类似的胰酶替代物，如Accutase细胞消化液，因其纯度高，细胞伤害小，消化作用温和，且不含任何动物或者细菌来源组分，可满足对后续如细胞表面标记、病毒生长分析、流式细胞分析以及生物反应器相关检测等多种实验的要求。可以说是是胰蛋白酶消化液的完美替代产品。

四 胶原酶

胶原和网状纤维，非常适用于用于解离富含胶原蛋白的组织和细胞。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：

1.胶原酶Ⅰ，通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的消化；

2.胶原酶II，用于心脏、骨、肌肉、肝、甲状腺和软骨等组织来源细胞的消化；

3.胶原酶III，常用于乳腺细胞的消化；

4.胶原酶IV，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。胶原酶Ⅴ，适用于胰腺小岛细胞和结缔组织细胞的消化。

五 其他消化酶

Dispase II，即分散酶II，是一种非特异性金属蛋白酶，在细胞生物学中常用于从不同的组织或器官分离出单细胞，并用于后续细胞培养，如原代细胞的分离，细胞传代等，还可用于消除悬浮细胞培养过程中发生的细胞聚集。

该酶具有以下优势：快速有效且温和，对细胞损伤小，能维持细胞膜完整性；来源于细菌，无支原体或其他动物病毒污染；稳定性强，不受温度、pH及血清组分的影响；可用于多种类型组织和细胞的分离等。

实验小贴士

1.选择合适的消化酶。

2. 消化时间控制：消化时间过长会损伤细胞，过短又可能消化不完全。建议初次使用时先小规模实验，找到最适合细胞的消化时间。

3.避免消化时过度吹打对细胞造成机械损伤。

4.避免消化过程中和消化液保存过程中的污染。

细胞实验虽然看起来复杂，但只要选对工具，就能轻松搞定。希望这篇小分享能帮到你，让你的实验一路顺风！如果还有其他疑问，欢迎留言交流哦。

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